Revista Tendencias en Docencia e Investigación en Química Año 2 Número 2 Año 2016 Efecto tóxico de la acrilamida en ratas Wistar hembra Gaona Uribe Jessica Guadalupe, Chirino Galindo Gladys Universidad Nacional Autónoma de México. Laboratorio del Metabolismo de la Diabetes Mellitus, Unidad de Morfología y Función. Facultad de Estudios Superiores Iztacala. Av. de los Barrios No. 1 Los Reyes Iztacala. Tlalnepantla. C.P. 54090. Estado de México, Méxoco. *Autor para correspondencia: gchirinog@hotmail.com Recibido: RESUMEN 17/mayo/2016 La acrilamida se produce mediante la reacción de Maillard, la cual aporta sabor, color y aroma a los alimentos. Con el objetivo de evaluar su toxicidad se utilizaron Aceptado: 20 ratas Wistar hembra de 250 a 300 g de peso, las cuales fueron asignadas al azar a tres grupos que recibieron dosis de 1.4, 1.7 y 2 mg/kg al día, vía oral; más un grupo 31/agosto/2016 control sin acrilamida, por 21 días. Los resultados muestran una disminución en el peso corporal en los últimos días del tratamiento en los grupos con dosis de 1.7 y 2 mg/kg, y una baja producción de ovocitos en todos los tratamientos. Se reporta Palabras clave glomerulonefritis en el riñón, signos de cirrosis congestiva o hiperemia pasiva en el Acrilamida, histología, hígado, y en tejido cerebral se encontró inicio de neuropatía periférica. En base a los daños encontrados, se concluye que la acrilamida tiene alta toxicidad en ratas. Rattus norvegicus Keywords ABSTRACT Acrylamide, histology, Acrylamide is produced across the Maillard reaction, which adds flavor, color and Rattus norvegicus fragrance to foods. In order to evaluate acrylamide toxicity, 20 female Wistar rats, weighing 250 to 300 g were used. Females were randomly distributed in three groups, that received doses of 1.4, 1.7 and 2 mg/kg per day, orally; and a control group without acrylamide, for 21 days. The results shown a decrease in body weight in the last days of the treatment in the 1.7 and 2 mg/kg dose groups, and a low production of ovocytes in all treatments. In the tissues, of the organisms under treatment, glomerulonephritis in kidney was observed; the liver shown signs of congestive cirrhosis and passive hyperemia, and in brain beginning of peripheral neuropathy was found. With basis in the damages found in the tissues evaluated, the main conclusion is that acrylamide has high toxicity in rats. Universidad Autónoma Metropolitana QA128 Revista Tendencias en Docencia e Investigación en Química Año 2 Número 2 Año 2016 Introducción corporal/día. La información disponible en la actualidad es insuficiente para hacer estimaciones sobre la ingesta La alimentación tradicional a lo largo del tiempo, total de acrilamida a través de la alimentación, algunos siempre ha sido integral y natural. La vida moderna ha estudios indican que la ingesta podría ser hasta de 100 degenerado nuestra alimentación a tal punto que, no μg al día (Guibert 2011; Tareke et al., 2002). sólo la ha privado de muchos de sus principios nutricionales, sino que, además, le ha agregado agentes En los seres humanos y en los animales, se sabe que la extraños que perjudican la salud. exposición a bajos niveles de acrilamida causa daño al sistema nervioso, también es considerada como un Es por ello que la incidencia de enfermedades crónicas agente tóxico para las células somáticas y germinales, lo no deja de aumentar. Los alimentos procesados y la que le confiere propiedades mutagénicas y llamada “comida basura” contienen sustancias carcinogénicas. La neurotoxicidad es el riesgo más altamente peligrosas como las nitrosaminas, el importante al ingerir acrilamida (Infanzón, 2005; amoniaco, las aflatoxinas y las acrilamidas (Clínica Valenzuela y Ronco, 2007). Centro Granada, 2011). El uso de las ratas como modelos experimentales se La acrilamida es una sustancia que no se encuentra en debe, a que las ratas y ratones están entre los animales forma natural en los alimentos, se produce durante la que responden más uniformemente a esos fritura de productos ricos en almidón, durante una serie requerimientos, son de fácil manejo y poseen las de reacciones químicas denominadas Reacción de características zootécnicas adecuadas (Osorio- Maillard, la cual aporta sabor, color y aroma a los Rosenkranz, 2006). alimentos, deseables para la aceptación por parte del consumidor (García-López y Alfaro-Macedo, 2007). En 2005 un Comité Mixto de Expertos de la Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura La Food and Drugs Administration (FDA) encontró y la Alimentación (FAO) y la Organización Mundial de la acrilamidas en más de 750 alimentos entre ellos las Salud (OMS), determinaron el NOAEL (Nivel sin efecto patatas fritas y aperitivos; los estudios de monitoreo adverso observable) para la acrilamida en dosis de 2 indican que la acrilamida forma parte del 27.7% de los mg/kg al día. alimentos en la compra promedio norteamericana. Benítez et al. (2004) encontraron que la acrilamida a Debido a los recientes descubrimientos de la acrilamida dosis de 25 y 100 mg/kg de peso, produce severos en los alimentos y el alto consumo de alimentos fritos en cambios en los marcadores hepáticos enzimáticos en la población mexicana, se puede esperar la aparición de ratones adultos, que la acrilamida ejerce una acción efectos dañinos en personas expuestas a esta dieta tóxica sobre la estructura del parénquima hepático, y (Infanzón, 2005). que la viabilidad se afecta dependiendo de la dosis. Dentro de los alimentos que contienen acrilamidas, está Koyama et al. (2011) demostraron que había mayor el pan de caja, pastas, arroz, salsas, carnes, galletas, rango de incidencia de acrilamida dependiendo de la cereales, cerveza, pizza y productos a base de papas, edad (3 a 11 semanas), las ratas fueron tratadas durante maíz y harina. Casi la mitad de los mexicanos (49.3%) un mes por vía oral, con dosis de 20, 40 y 80 ppm; los asocia la comida chatarra con las papas y frituras; este resultados no fueron significativos en tiroides y tipo de comida es consumido con mayor frecuencia glándulas mamarias, sin embargo, a 80 ppm en hígado y entre hombres jóvenes de entre 18 y 29 años (Amrein et testículo si se produjo daño, ya que se produjo un al., 2003; Gomar y Lauzurica, 2007). aumento de la actividad de GPT al doble, solo en ratas jóvenes de tres semanas. Las acrilamidas también se forman cuando alimentos de origen vegetal, que contienen una gran cantidad de Sánchez et al. (2009) determinaron el efecto de micro carbohidratos y pocas proteínas, se cocinan a altas alga en un modelo de neuropatía axonal en ratas temperaturas, superiores por lo general a 120°C inducida por acrilamida, la cual fue administrada vía (Valenzuela y Ronco, 2007). subcutánea con dosis de 70 µg/kg, y se produjo hipotonía muscular, flacidez en la cola y arrastre en Tras su ingesta, la acrilamida es absorbida rápidamente extremidades; en la fase recuperativa se administró a un por el aparato digestivo y distribuida en los fluidos grupo, una dosis de 400 mg/kg de acrilamida + corporales. En 1985 la OMS estableció un valor de spirulina, y la proporción de animales afectados se ingesta diaria tolerable (IDT) de 12 μg/kg de peso redujo en su totalidad. Universidad Autónoma Metropolitana QA129 Revista Tendencias en Docencia e Investigación en Química Año 2 Número 2 Año 2016 Besaratinia y Pfeifer (2013) evaluó la genotoxicidad de Procesamiento de Material Biológico la acrilamida y su metabolito la glicidamida, en células epiteliales humanas y fibroblastos de ratón tratadas con Al término de las tres semanas, se sacrificaron las ratas diferentes dosis de ambos (50 nM, 500 nM, 5 µM, 500 con sobredosis de pentobarbital sódico (100 mg/Kg de µM, 5 mM, y 10 mM) respectivamente, durante 4 horas, peso), se realizó una laparotomía y se extrajeron los y encontró que la glicidamida es responsable de ovarios, los riñones y el hígado. El cráneo se abrió y se mutagénesis ya que produce aductos de DNA. extrajo el cerebro. Los resultados de diversos estudios in vivo e in vitro han Los ovarios se colocaron en solución salina en frío para demostrado que la exposición a acrilamida puede el conteo de ovocitos bajo el microscopio estereoscópico producir efectos cancerígenos y alteraciones en el Leica MZ6. sistema reproductivo, nervioso y genético, sin embargo, El resto de los órganos se separaron por tratamiento y no se dispone de los suficientes estudios se fijaron con alcohol al 70% en baño frio. Se utilizó la epidemiológicos y toxicológicos que permitan establecer técnica histológica convencional de deshidratación, una relación entre la presencia de acrilamida en los aclaramiento, inclusión, imbibición, inclusión, corte y alimentos con el desarrollo de alguna enfermedad. Ya tinción H y E (Barrera et al., 2010). que se han reportado en múltiples estudios los efectos tóxicos que la acrilamida provoca en el sistema Se observaron las muestras con un microscopio óptico nervioso, en células germinales y somáticas, se espera Leica DM500, acoplado a una cámara fotográfica Leica que a diferentes concentraciones provoque alteraciones ES3. Y se tomaron diversas fotografías. en la estructura histológica de diversos órganos de ratas hembra. Resultados y discusión Peso corporal Metodología Este parámetro se mantuvo en constante cambio. El Reactivos grupo control fue menos variable, los grupos con dosis Todos los reactivos empleados en este trabajo fueron de 1.7 y 2 mg/kg tuvieron cambios más pronunciados, esto las marcas Sigma Chemical Co, Merck o J.T. Baker, y se podría ser efecto de la acrilamida sobre los organismos, obtuvieron por el Módulo de Metodología Científica de ya que, el peso final con respecto al peso inicial es la FES Iztacala. mucho más bajo, por lo cual se puede decir que los miembros de estos tratamientos sufrieron una baja de Material Biológico peso del día 1 al día 21. Mientras que el peso final en el control y el tratamiento 1.4 mg/kg es mayor al peso Se obtuvieron 20 ratas hembra (Rattus norvegicus) con inicial (Figura 1). un rango de peso de 250 a 300 g en el bioterio de la Facultad de Estudios Superiores Iztacala, y se asignaron al azar en cuatro grupos de 5 individuos. Los organismos se mantuvieron a temperatura de 22-23 oC, con 50-60% de humedad ambiental relativa, ciclos luz: oscuridad de 12:12 iniciando a las 8:00 AM, con agua y alimentación (Harlan 2018s) ad libitum. Tres grupos fueron sometidos a administración de acrilamida (Merck) de 1.4, 1.7 y 2 mg/kg por día, durante 3 semanas, por vía oral, ya que se ha reportado que a dosis de 2.0 mg/Kg se inducen tumores en distintos órganos de roedores (Guibert, 2011). El volumen que se les administró a los organismos fue de 100 μL; mientras que al control se le administró solamente agua (el vehículo donde se disolvió la acrilamida). Figura 1. Peso de las ratas bajo tratamiento con acrilamida durante el experimento. Universidad Autónoma Metropolitana QA130 Revista Tendencias en Docencia e Investigación en Química Año 2 Número 2 Año 2016 Nuestros datos no coinciden con Sánchez et al. (2009) Hígado quienes reportan que no hubo diferencias significativas en el peso corporal entre los diferentes grupos a lo largo En los hígados se presentó una congestión (hiperemia de su investigación, esto podría estar relacionado con pasiva), esto se debe a la disminución del flujo venoso los inhibidores del metabolismo energético y la sanguíneo desde una área, se caracteriza por dilatación anaerobiosis los cuales hacen que aumente el peso de de venas y capilares, los tejidos presentan color rosa o los tejidos por el incremento de agua intracelular rojo, fenómeno conocido como eritema, las lecciones (Contreras, 1989), lo cual puede verse en que los hepáticas varían según la intensidad y la duración de la hígados de nuestros tratamientos mostraron un congestión en este caso es un hígado cardiaco fase uno, aumento de peso con respecto al grupo control, esto con ya que la superficie fue lisa, de color café rojizo base a que algunas sustancias químicas como la microscópicamente las venas centro lobilillales y los acrilamida pueden convertirse en metabolitos tóxicos capilares sinusoidales vecinos están muy dilatados y reactivos que pueden provocar lesión en la membrana y llenos de sangre, con atrofia de los hepatocitos centro en el citosol por enlace covalente directo con las lobulillares (Contran et al., 1999). proteínas y lípidos de membrana, lo que provoca la Con respecto al tratamiento de 2 mg/kg de acrilamida se formación de radicales libres y por consiguiente la observa un carcinoma fibrolaminar, que suele formar un peroxidación lipídica (Contran et al., 1999). único tumor grande y duro, con bandas fibrosas que lo Esto coincide con lo reportado por Gay et al. (1994) atraviesan. histológicamente, está formado por células quienes marcan que una mayor pérdida de peso poligonales bien diferenciadas que crecen formando corporal, está relacionada con el inicio de neuropatía nidos o cordones, separados por láminas paralelas de causada por consumo de acrilamida según lo haces densos de colágeno (Contran et al., 1999), encontrado por Braojos y Lampurlanés (1998). resultados que coinciden con los de Benitez et al. (2004) quienes reportan un serio daño en el hígado en la Ovocitos administración más alta de acrilamida. Los ovocitos de los tratamientos 1.7 y 2 mg/kg, fueron Las características en los cortes histológicos de hígado menos en comparación con el control. Esto coincide con del grupo 1.7 y 2 mg/kg muestran signos de cirrosis lo reportado por Koyama et al. (2011) que marcan un congestiva (Figura 3) que es producida por una daño en los testículos de ratas. La disminución en la congestión pasiva, prolongada grande o intermitente. producción de ovocitos se puede ver afectada por la incidencia de insuficiencia renal y hepática, así como Las cirrosis tienen como patrón tener una cicatrización enfermedades mentales y tóxicos químicos como es el difusa, lesiones necróticas de manera inconstante, entre caso de la acrilamida, ya que se daña el funcionamiento otras características (Contreras, 1989) con base a lo del eje Hipotálamo-Hipófisis-Gónadas (De la Parra et al., reportado por Zafar et al. (2009) quienes 2013). En la figura 2 se observa el número de ovocitos microscópicamente, en el hígado encontraron recuperados por tratamiento. congestiones en las venas porta y los sinusoides con una degeneración de los hepatocitos centrolobulillares en el estudio de la alteración de la morfología del hígado en ratas diabéticas inducidas por estreptozotocina. Riñón Los riñones de los grupos a los que se les administró acrilamida presentaron glomerulonefritis, que es caracterizada por la inflamación de los glomérulos por la filtración de proteínas provenientes del torrente sanguíneo y por la proliferación de células glomerulares, como lo describen Argote et al. (2004). En la muestra de riñón de 1.7 y 2 mg/kg se muestra una glomerulonefritis con semilunas(Figura 4). Una Figura 2. Conteo de ovocitos por efecto de tratamiento con semiluna epitelial es una proliferación de las células acrilamida [Promedio ± desviación estandar de 5 epiteliales que revisten la cápsula de Bowman; al determinaciones. +P < 0.05 con respecto al control, *P < 0.05 entre los distintos grupos]. aumentar el tamaño de las semilunas, estas comprimen Universidad Autónoma Metropolitana QA131 Revista Tendencias en Docencia e Investigación en Química Año 2 Número 2 Año 2016 el penacho glomerular que se encoge y se vuelve afuncional. A B A B C D C D Figura 3. Cortes histológicos de hígado de cada tratamiento Figura 4. Cortes histológicos de riñones de rata hembra 10 X tinción H y E. A: control; B: tejido de ratas sometidas a sometidas a tratamiento con acrilamida. A: control; B: tejido acrilamida 1.4 mg/Kg; C: hígado de ratas sometidas a 1.7 de ratas sometidas a acrilamida 1.4 mg/Kg; C: riñón de ratas mg/Kg; D: hígado de ratas tratadas con 2.0 mg/Kg. sometidas a 1.7 mg/Kg; D: riñón de ratas tratadas con 2.0 mg/Kg. En el estudio de la glomerulonefritis proliferativa, la presencia de gran número de glomérulos con semilunas En los tratamientos la estructura del cráneo era un tanto indica rápida progresión a insuficiencia renal (Stevens frágil y en el grupo control el cráneo era más resistente, and Lowe, 2001) mismos que coinciden con Mohammad al igual que los músculos maxilofaciales, en el grupo et al. (2009) quienes reportan una suave congestión en control, eran más fibrosos en comparación con los los glomérulos, congestión focal y vacuolar, así como la tratamientos. Los resultados muestran lo que podría degeneración de células tubulares ocasionados por la llamarse el inicio de una neuropatía periférica, ya que exposición a formaldehido. las neuropatías periféricas pueden aparecer tras la exposición a productos químicos industriales, o ambientales, a toxinas biológicas o a fármacos, mismas Cerebro que se caracterizan con placas amarillentas que Durante el sacrificio, el grupo control mostró mayor corresponden a zonas de necrosis y mineralización de resistencia ante el pentobarbital sódico, y en cuanto a sustancia blanca (Contran, 1999). Datos similares a los movimiento post mortem se observaron mayor cantidad que mencionan Gay et al. (1994) que relacionan el de reflejos que en los otros grupos con tratamiento de principio de una neuropatía, con la pérdida de peso 1.4, 1.7 y 2 mg/kg, lo que indica un daño a nivel de corporal y la disminución de tejido muscular. sistema nervioso ya que los xenobióticos o sus A nivel histológico, los cerebros de ratas con metabolitos, son responsables de este efecto adverso tratamiento 2 mg/kg presentaron alargamiento de como resultado de la interacción directa con el SNC células piramidales, hinchazón de capilares y en el (Regidor y Solans, 1998) por otra parte, la tratamiento 1.7 mg/kg se muestra una ausencia de sintomatología observada fue variada dependiendo de si tejido y células piramidales en menor cantidad, lo cual la exposición a estos es aguda o crónica, en la extracción coincide con Nascimento et al. (2012) y Said (2007) del cerebro se observaron variaciones en el grueso del quienes caracterizaron por presentar una distribución cráneo. Universidad Autónoma Metropolitana QA132 Revista Tendencias en Docencia e Investigación en Química Año 2 Número 2 Año 2016 multifocal, con alargamiento de nervios (ulnar y fibular) Agradecimientos como una neuropatía axonal y sensorial ya que los nervios, presentaron células mononucleares inflamadas, Al Dr. Martín Palomar, por permitirnos el uso del vasículas epineurales alrededor, indicando micrótomo y los microscopios óptico y estereoscópico, microvasculitis, así como pérdida de nervios fibrosos y así como por la revisión crítica del presente reporte. degeneración axonal (Figura 5). Al M. en C. Fernando Barrón Moreno, del Bioterio de la FES-I por las facilidades prestadas en la obtención y manipulación de los organismos. B A Al personal del T.E.L.E de la FES-I, en especial al Biól. José Martínez Aguilar (R.I.P.) por su colaboración para la obtención del material. A Laura Ramos, Andrea Colis, Gloria Lona y Alfonso Tovar por el apoyo brindado para la realización de este trabajo. Referencias Argote E., Castro A.L., y Otero L.M. (2004). Glomerulonefritis. Colombia Médica, 35(1): 38-45. C D Amrein T.M., Bachmann S., Noti A., Biedrmann M., Ferraz M., Biedrmann B.S., Grob K., Keiser A., Escher P.F. y Amadó R. (2003). Potential of Acrylamide Formation, Sugars, and Free Asparagine in Potatoes: A Comparison of Cultivars and Farming Systems. J. Agric. Food Chem 51: 5556-5560. Figura 5. Cortes histológicos de cerebro de cada tratamiento 10X tincion H y E. A: control; B: tejido de ratas sometidas a Barrera M., Canales M.M., Camarena G., Castillo I., acrilamida 1.4 mg/Kg; C: cerebro de ratas sometidas a 1.7 Fregoso M.L., García A.M., González D., Hernández C.T., mg/Kg; D: cerebro de ratas tratadas con 2.0 mg/Kg. Martínez J., Muñoz A., Palomar M., Segura B., Vilches A.A. (2010). Métodos de Laboratorio. 1era Ed. Fes Iztacala Conclusiones UNAM. p. 37-52. La acrilamida es un tóxico en ratas hembra a dosis de Benites C., Lucas A., Aispurú G., Alvarez M., Llanos I., 1.4, 1.7 y 2mg/kg al día, siendo el rango de 1.7 a 2mg/kg Quintana R., Miño C., Aguirre M., Brandan N. (2004). al día los más dañinos para el organismo. Efectos de un potencial hepatotóxico: la Acrilamida El consumo de acrilamida en dosis de 2, 1.7 y 1.4 mg/kg Monomérica, en un modelo murino. Facultad de por día, provoca una marcada disminución en la Medicina U.N.N.E. Argentina producción de ovocitos. Besaratinia A., Pfeifer G.P. (2004). Genotoxicity of La acrilamida daña significativamente el hígado de una acrylamide and glycidamide. J. Nat. Cancer Inst. 96 (13): forma severa en tratamientos con 2 mg/kg y 1.7 mg/kg 1023-1029. por día. En el cerebro la acrilamida provoca una disminución en Braojos L.R., Lampurlanés X.S. (1998). NTP 487: las células piramidales y la neuroglia en dosis de 1.7 y Neurotoxicidad: agentes neurotóxicos. Ministerio de 2mg/kg. trabajo y asuntos sociales de España. El riñón experimenta glomerulonefritis en dosis de 1.7 y 2mg/kg al día de acrilamida. Contreras R. (1989). Anatomía Patológica General. 1era Se sugiere repetir la investigación, aumentando el Ed. interamericana. pp. 63-69, 93, 264, 273. tiempo de exposición a la acrilamida. Contran R.S., Kumar V., Collins T. (1999). Patología También se sugiere utilizar algún componente químico Estructural y Funcional. 1era Ed. Mc GrawHill. p. 7-16, para revertir los daños en los órganos afectados. 887- 929, 991-1010, 1349-1380. Se propone para estudios posteriores evaluar la viabilidad de los ovocitos o el efecto teratogénico de la acrilamida. Universidad Autónoma Metropolitana QA133 Revista Tendencias en Docencia e Investigación en Química Año 2 Número 2 Año 2016 Clínica Centro Granada (2011). Alimentación actual y Nascimiento O., de Freitas M., Escada T., Marques W., enfermedad crónica. Recuperado el 8 de agosto del Cardoso F., Pupe C., Duraes S. (2012). Leprosy late onset 2013 de neurophaty: an uncommon presentation of leprosy. Arq. http://clinicacentrogranada.blogspot.mx/2013/03/ Neuropsiquiat. 70(6): 404-406. alimentacion-actual-y enfermedadcronica.html Osorio M., Rosenkranz A. (2006). Guía para el uso de De la Parra I., Oizerovich S., De Fernandez M. animales de laboratorio I. Facultad de Ciencias, Alteraciones del eje reproductivo por enfermedades Universidad Nacional de Colombia. p. 325-331 crónicas o sistémicas, substancias tóxicas y drogas ilícitas. (s.f.) Recuperado el 27 de noviembre del 2011 Regidor L., Solans X. (1998). Neuro toxicidad: de agententes neurotóxicos. España. Recuperdo el 12 de http://gineadol.com.ar/Documentos/Alteraciones%20d agosto 2011 de el%20eje%20reproductivo.pdf http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Document acion/FichasTecnicas/NTP/Ficheros/401a500/ntp_487 FAO-OMS (2002). Las concentraciones de acrilamida en .pdf los alimentos y sus posibles efectos en la salud pública. Ginebra. Recuperdo el 13 de agosto 2011 de Said G. (2007). Focal and multifocal diabetic http://www.who.int/mediacentre/news/notes/2005/n neuropathies. Arq. Neuropsiquiatr. 65 (4-B): 1272-1278. p06/en/ Sánchez N., Wong M., Pérez-Saad H., León N., García J.D. García-López A., Alfaro-Macedo M.P. (2007). Acrilamida (2009). Efecto de Spirulina platensis en la neuropatía en alimentos para consumo humano. Rev. Sanid. Milit. axonal inducida por acrilamida en ratones. Rev. Cub. Mex. 61(6): 384-388. Plant Med. 34(1) 1-8. Gay J., Porrata C., Hernández M., Clúa A., Arguelles J. Stevens A., Lowe J. (2001). Anatomía patológica. 2 ed. (1994). Factores dietéticos de la neuropatía epidémica Harcourt. p. 359-368. en la Isla de la Juventud, Cuba. Bol. Of. San. Panam. Tareke E., Rydberg P., Karlsson P., Eriksson P., Törnqvist (OSP); 117(5): 389-399. M. (2002). Analysis of acrylamide, a carcinogen formed Guibert R.J. (2011). Acrilamida. Memorias del curso de in heated foodstuffs. J. Agric. Food Chem. 50: 4998-5006. Toxicología y Química forense de la Universidad de supercapacitor electrodes. J. Mater Chem., 22: 23439- Belgrano. Argentina. Recuperado el 10 de agosto de 23446. 2013 de Xu L., Cheng L. (2013). Graphite Oxide under High http://www.ub.edu.ar/revistas_digitales/Ciencias/Vol1 Pressure: A Raman Spectroscopic Study. Journal of 2Numero2/Articulo_acrilamida.pdf. Nanomaterials. 47: 508-516. Infanzón R.M. (2005). Toxicidad en los alimentos: la acrilamida. La ciencia y el hombre, No. 2, p. 47-52. Zhu Y., Murali S., Stoller M. D., Velamakanni A., Piner R. D., Ruoff R. S. (2010). Microwave assisted exfoliation Koyama N., Yasui M., Kimura A., Takami S., Suzuki T., and reduction of graphite oxide for ultracapacitors. Masumura K. (2011). Acrylamide genotoxicity in young Carbon. 4 8: 2 1 0 6 –2 1 2 2. versus adult GPT delta male rats. Mutagenesis 26 (4): 545-549. Valenzuela, B. R. y Ronco, A-M. (2007). Acrilamida en los alimentos. Rev. Chil. Nutr. 34 (1): 8-16. Lauzurica Z.L., Gomar J. (2007). Acrilamida en patatas fritas y productos de aperitivo elaborados en la Zafar M., Naeem-Ul-Hassan Naqvi S., Ahmed M., Comunidad Valenciana. Gac. Sanit. 21(4): 334-337. Kaimkhani Z. (2009). Altered liver morphology and enzymes in streptozotocin induced diabetic rats. Int. J. Mohammad J., Azarhoush R., Ghafari S., Davaria A., Morphol., 27 (3): 719-725. Amirhossein, S. (2009). Can formaldehyde exposure induce histopathologic and morphometric changes on rat kidney? Int. J. Morphol. 27(4): 1195-1200. Universidad Autónoma Metropolitana QA134