Estandarización de RT-PCR durante la expresión diferencial de genes en el proceso de hidratacióndeshidratación de Ferocactus peninsulae y Ferocactus recurvus

Abstract

El objetivo del presente estudio fue estandarizar la técnica de RT-PCR para la expresión diferencial de genes durante la germinación de F. peninsulae y F. recurvus con tiempos de hidratación-deshidratación. Se empleó cDNA obtenido previamente a distintos tiempos de germinación con un tratamiento de hidratación y deshidratación. Previo a la estandarización, se diseñaron los iniciadores a utilizar por medio del programa primer3 para posteriormente evaluar su calidad junto con la del cDNA, la RT-PCR se llevó a cabo con kits comerciales. Se amplificaron regiones de los genes CASP, ULP, SEEP, LEAP, FEER, TRXH, junto con ACTINA para cactáceas como testigo. Los resultados de la RT-PCR determinaron en relación a la expresión de actina y la técnica fue capaz de reconocer diferencias de expresión entre cada tiempo, gen y especie.

The objective of this study was to standardize the RT-PCR technique for differential gene expression during germination of F. peninsulae and F. recurvus with hydrationdehydration times. CDNA previously obtained at different germination times was used with a hydration and dehydration treatment. Prior to standardization, the first ones to be used were designed through the primerr program to subsequently evaluate their quality along with that of the cDNA. The RT-PCR was carried out with commercial kits. Regions of the CASP, ULP, SEEP, LEAP, FEER, TRXH genes were amplified, along with ACTINA for cacti as control. The results of the RT-PCR were determined in relation to actin expression and the technique was able to recognize differences in expression among each time, gene and species.